Ia型和III型无乳链球菌生长特性差异性比较
根据荚膜多糖的类型,无乳链球菌分为10种不同的血清型(Ia、Ib、II-IX型),其中Ia型和III型是无乳链球菌感染人、牛和鱼的主要血清型。目前对于不同血清型无乳链球菌间生物学特性差异分析的报道还很缺乏。本实验对两株血清型分别为Ia型和III型的齐口裂腹鱼源无乳链球菌在生长特性、生理生化特性进行差异性比较,为探究该病原菌不同血清型的致病机制提供实验依据。
1、实验条件设定
1.1两株菌体外生长曲线的测定用BHI液体培养基将两种细菌的菌液OD600nm值调整一致后分别接种于BHI液体培养基中28℃、180 r/min培养,每隔2 h取样,测定其OD600nm值,直至OD600nm值不再增长为止,绘制两株菌的体外生长曲线。
1.2温度、pH值、盐浓度对两株菌生长的影响在BHI液体培养基中接入等量两株菌的菌液,分别在24℃、28℃、32℃和37℃,pH为5.0、6.0、7.0、8.0和9.0,氯化钠浓度为0、0.5%、1%、2%、4%和8%条件下180 r/min震荡培养,每隔4 h取样测定两种菌菌液OD600nm值,分别绘制温度、pH、盐浓度对两株菌生长影响的生长曲线。
2、结果
2.1两株菌的生理生化特性的测定VITEK 2 COMPACT 30全自动细菌分析系统检测和补充生化试验结果见表1,结果表明S03株和S07株在生理生化特性上表现出明显差异,S07株相对于S03株缺乏利用多种糖类、代谢酶的能力。
表1 S03和S07株S.agalactiae的生化试验结果
2.2两株菌体外生长曲线的测定血清III型S03株和Ia型S07株的生长曲线显示,S03株的对数期在6 h~18 h,20 h以后进入稳定期;S07株的对数期在20 h~42 h,46 h以后进入稳定期(图1)。表明,S03株的生长明显快于S07株,而且S03株的OD600nm最大值约是S07株的2倍。
图1 S03株和S07株的生长曲线
2.3温度、pH和盐浓度对两株菌生长的影响
温度对S03株和S07株影响的生长曲线显示,以28℃时的生长曲线为参考,S03株和S07株在32℃和24℃时其生长受温度影响的趋势相对一致,而S03株在37℃时生长速度较快,S07株在37℃时不生长(图2)。表明S03株对温度的耐受能力强于S07株。
pH对S03株和S07株影响的生长曲线显示,以在pH7.0时的生长曲线为参考,S03株和S07株在pH6.0、pH8.0和pH9.0时变化基本一致,而在pH5.0时,S03株的生长受其影响程度要小于S07株(图3)。表明S03株对pH的耐受能力强于S07株。
盐度对S03株和S07株影响的生长曲线显示,以盐度为0时生长曲线为参考,在盐度分别为0.5%、1%、和8%时S03株和S07株生长曲线变化趋势基本一致,但在盐度为2%时,S03株生长受其影响较小,S07株生长则明显受到抑制,而且在盐度为4%时,S03株能够生长但S07株不能生长(图4)。表明S03株对盐浓度耐受能力强于S07株。
图2温度对S03株和S07株生长影响的生长曲线
图3 pH对S03株和S07株生长影响的生长曲线
图4盐度对S03株和S07株生长影响的生长曲线
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