普城沙雷菌对黄瓜生长品质、根际土壤微生物数量的影响（一）
植物根际促生细菌（plant growth promoting rhizobacteria，简称PGPR）是指自由存在于植物根际范围中的一类可促进植物生长、防治病害、增加产量的细菌的统称。PGPR菌株可通过溶磷、解钾、固氮、产生植物激素等作用，直接促进植物生长，提高产量；还可以通过产生嗜铁素和抗生素等抑制病原物的生存与繁殖，进而减轻作物病害，改善植物根际土壤微生态环境，间接促进植物生长。如：从辣椒根际分离得到的具有产生IAA能力的枯草芽孢杆菌NJAU-G10能显著促进辣椒幼苗的生长和根系发育；枯草芽孢杆菌QM3能显著增加番茄植株叶片数，促进番茄株高及根系发育，且有效防治番茄早疫病；在大豆根际同时接种慢生大豆根瘤菌和胶质类芽孢杆菌后，土壤酶活性显著提高。由于PGPR具有促进植物生长、防治植物病害和改善植物根际土壤微生态环境的优良特性，因此，很多学者都积极投入到PGPR的开发、应用研究中。邱勤等研究指出，将PGPR菌剂施于土壤后，能显著促进苜蓿的生长，同时增加土壤中细菌、真菌、放线菌等微生物的数量，进而提高土壤养分。普城沙雷菌（Serratia plymuthica）A21-4是从洋葱根际土壤中分离出的辣椒疫病生防菌，能有效定殖在辣椒根系及根际土壤，抑制辣椒疫病的发生，同时，能显著促进辣椒生长，改善辣椒根际土壤微生态环境。
在前期普城沙雷菌对辣椒的促生作用研究的基础上，本试验探究了普城沙雷菌对黄瓜生长及根际土壤微生态环境的影响，以期为普城沙雷菌在黄瓜实际生产中的应用提供理论依据。
1材料与方法
1.1试验材料
普城沙雷菌的利福平标记菌株（100μL·mL-1）由河南农业大学植物病害生物防治研究室在-80℃超低温冰箱保存备用；黄瓜品种为寒育6号（河南豫艺种业科技发展有限公司选育）；供试培养基为TSA培养基（Tryptic Soy Broth Difco.30 g，琼脂18 g，蒸馏水1 000 mL）、AIA培养基（Actinomycete Isolation Agar Difco.22 g，蒸馏水1 000 mL）和PDA培养基（Potato Dextrose Broth Difco.24 g，琼脂18 g，蒸馏水1 000 mL）。
1.2试验方法
本试验于2017年1～6月在河南省郑州市毛庄绿园蔬菜基地进行。1月17日在日光温室穴盘播种育苗，2月17日移栽到大棚，施肥按照蔬菜基地常规管理进行，6月15日拉秧结束。
1.2.1 普城沙雷菌菌悬液的配制及处理
将普城沙雷菌在TSA培养基上培养48 h后，用0.1 mol·L-1MgSO4无菌溶液配制成108cfu·mL-1的普城沙雷菌菌悬液。黄瓜育苗期和田间生育期分别用普城沙雷菌菌悬液处理，在育苗期，第1片真叶展开时，用普城沙雷菌菌悬液进行灌根处理（50 mL·株-1）；移栽10 d后再用普城沙雷菌菌悬液进行灌根处理（200 mL·株-1），以清水处理为对照，每个处理设3次重复，每个重复150株（6行·重复-1，25株·行-1）。
1.2.2黄瓜生育指标和生理指标的测定
2月17日，即黄瓜播种后30 d，每个重复选9株，每个处理3次重复，测定黄瓜苗期株高、茎粗、地上部鲜质量、根鲜质量和第3片真叶的叶绿素含量；3月19日，即移栽后30 d，每个重复取5株，每个处理3次重复，测定黄瓜开花期株高、茎粗、叶片数、叶面积和开花数；在黄瓜苗期（2月17日）、开花期（3月19日）、初果期（4月7日）、盛果期（5月2日）和采收后期（6月7日）分别测定根系活力。叶绿素含量的测定采用分光光度法，根系活力的测定采用氯化三苯基四氮唑法。
1.2.3黄瓜产量和品质相关指标的测定
黄瓜采收期，每个重复选取30株（6行·重复-1，5株·行-1），每个处理3次重复，采集黄瓜果实，采用称重法测定单株黄瓜果实质量，直至结果期完结后，计算单株产量和每667 m2产量。黄瓜初果期、盛果期和采收后期分别测定品质相关指标，VC含量采用2，6-二氯酚靛酚滴定法测定，蛋白质含量采用考马斯亮蓝G250法测定，可溶性糖含量采用蒽酮比色法测定。
1.2.4黄瓜根际土壤酶活性的测定
在黄瓜开花期、初果期、盛果期和采收后期分别测定根际土壤脲酶、磷酸酶、过氧化氢酶和蔗糖酶活性。黄瓜根际土壤样品的采集：轻轻拨开黄瓜表层土壤，收集黄瓜根际土壤，过60目筛，每处理3次重复。脲酶活性采用苯酚钠-次氯酸钠比色法测定，磷酸酶活性采用磷酸苯二钠比色法测定，过氧化氢酶活性采用高锰酸钾滴定法测定，蔗糖酶活性采用3，5-二硝基水杨酸比色法测定。
1.2.5黄瓜根际土壤微生物数量的测定
在黄瓜开花期、初果期、盛果期和采收后期分别测定黄瓜根际土壤细菌、真菌和放线菌的数量。土壤样品的采集方法同1.2.4，根际土壤微生物的测定采用稀释平板涂布法。称取1 g土样，倒入装有100 mL无菌水的三角瓶中，充分振荡，然后用无菌水进行梯度稀释，配制成一系列浓度梯度的稀释液，将0.1 mL的稀释液均匀涂布在含PCNB的TSA平板上，置于28℃恒温箱中培养3 d后调查细菌数量；将0.1 mL的稀释液均匀涂布在含乳酸的PDA平板上，置于26℃恒温箱中培养5 d后调查真菌数量；将0.1 mL的稀释液均匀涂布在含乳酸的AIA平板上，置于28℃恒温箱中培养7 d后调查放线菌数量。调查细菌和真菌采用新鲜土样，调查放线菌采用自然风干的土样。
1.2.6黄瓜根际土壤速效氮、磷、钾的测定
在黄瓜开花期、初果期、盛果期和采收后期分别测定黄瓜根际土壤速效氮、磷和钾的含量。土壤样品的采集方法同1.2.4，速效氮含量的测定采用碱解扩散法，速效磷含量的测定采用碳酸氢钠法，速效钾含量的测定采用乙酸铵浸提，火焰光度法。
1.3数据处理与分析
采用Excel 2003和SPSS 13.0软件进行数据分析，采用Duncan氏新复极差法（SSR法）进行显著性检验。
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