枯草芽孢杆菌计数方法、稀释培养步骤与注意事项
在固体培养基上，枯草芽孢杆菌通常形成不规则的边缘波浪状或皱褶状菌落。菌落颜色通常为乳白色至淡黄色，菌落表面较为干燥，质地粗糙。
枯草芽孢杆菌为革兰氏阳性杆菌，呈短杆状或链状排列，在营养不足或其他压力条件下，枯草芽孢杆菌会形成芽孢。芽孢一般呈椭圆形，位于细胞的一端或中央，具有较高的抗逆性。
培养基的配置
具体步骤
①根据上表比例配置400mL的LB培养基，将封口膜封紧后放入高压灭菌锅中，121℃灭菌30min。②将培养基取出，放凉至50℃左右（用手摸锥形瓶不烫手）。③在超净工作台将放凉的培养基倒入平皿。④将平皿吹干，防止冷凝水聚集在平皿盖上。
注意事项：①无菌操作至关重要，超净工作台要提前紫外灯光灭菌，进入超净工作台的物与手都需要酒精消毒处理，同时，倒平板时需要在火焰旁进行。②平板倒置存放，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的冷凝水落入培养基，造成污染。③灭菌前应先检查培养基的pH值是否在适宜范围内，pH的适宜范围在：7.0~7.2。
检样制备与接种
初始悬液与十倍稀释
以无菌操作称取试样1g，加入9mL 0.85%灭菌生理盐水，均质1min~2min，制成1:10的初始悬浮液。吸取1:10的初始悬浮液1mL，加入9mL 0.85%灭菌生理盐水，经充分混匀后制成1:100的稀释液。据此方法进一步进行十倍系列递增稀释。
接种和培养
选择3个适宜的稀释度，用无菌移液管分别吸取0.1mL，接种到三个LB平板上。使用涂布棒尽可能小心快速地涂布接种液于琼脂表面。涂布好的平皿盖好，室温中放置15min，使接种物完全被琼脂吸收。翻转平皿在37℃±1℃培养箱中培养24h。
3注意事项①注意全程必须无菌操作。
②涂布棒在涂布前应经火焰灼烧，并且冷却后才可涂布。一个平皿用一支无菌涂布棒涂布。
③倒置培养基进行培养。
菌落计数计算方式
选取某一稀释度的枯草芽孢杆菌菌数介于30~300的平板，通过下式计算，即为1mL或1g样品中的枯草芽孢杆菌数：N=ΣA/(V*n*d)式中：N——每克或每毫升样品中枯草芽孢杆菌菌数，单位为CFU/g（mL）。ΣA——该稀疏度的所有平板枯草芽孢杆菌菌数总和；V——平板的接种体积，单位为毫升（mL）;n——该稀释度的平板数；d——该稀疏度的稀释因子。
检测结果
通过计数，在10-8的稀释梯度下，三个重复实验的平板上菌落数分别是131、102、120。故：每克样品中枯草芽孢杆菌菌数N=（131+102+120）/（0.1*3*10-8)=1.1*1011 CFU/g。