不同光照、pH条件对血红密孔菌培养过程中生物量、总抗氧化能力的影响（二）
2.2不同光照及pH条件对血红密孔菌培养过程中DPPH自由基清除能力变化的影响
2.2.1光照不同光照下，血红密孔菌液体培养过程中DPPH自由基清除能力的变化趋势大致相同(图3)。14 d光照培养下，血红密孔菌对DPPH自由基清除能力从第2天迅速上升至第4天达到最大值60.73%，到第6天降为40.41%，直到第12天达到57.54%，第14天下降至50.99%；1 d光照、1 d黑暗交替条件下，DPPH自由基清除能力在第2天达到最大值71.28%，之后迅速下降，于第6天降至42.77%，接下来的4 d先上升至49.70%(第8天)后下降最低值41.09%(第10天)，最后4 d出现增高，并于第14天达到64.58%；14 d黑暗培养下，DPPH自由基清除率的变化与1 d光照、1 d黑暗交替培养大致相同，于第4天达到最大值67.75%，于第6天降至最低值32.22%，第6～14天较平稳上升，并于第14天上升至62.23%。上述结果说明，相较于14 d光照和14 d黑暗条件，14 d光照、黑暗交替条件更利于血红密孔菌对DPPH自由基的清除，并于第2天达到峰值，为71.28%。
图3不同光照条件对血红密孔菌DPPH自由基清除能力的影响
2.2.2 pH值在血红密孔菌生长过程中，不同pH值对其DPPH自由基清除率的变化影响较大(图4)。当pH为3时，DPPH自由基清除率从第2天缓慢上升至第12天，并达到最大值85.96%，于第14天下降至48.46%；当pH为5时，DPPH自由基清除率先波动后下降，总体处于较低水平，最终降至43.75%；当pH为7时，DPPH自由基清除率由第2天的86.83%下降至第4天70.96%，随后缓慢上升并于第10天达最大值94.99%，随后下降，最终降至79.55%；当pH为9时，血红密孔菌对DPPH自由基的清除率一直处于波动状态，在第6天达最大值93.97%，随后处于下降趋势，最终于第14天降至69.73%。综上所述，pH为7时得到的DPPH自由基清除率峰值与其他3组相比最高，为94.99%，其次是pH 9。可见偏碱(pH 9和pH 7)条件下，血红密孔菌对DPPH自由基的清除能力较高。
图4不同pH条件对血红密孔菌DPPH自由基清除能力的影响
2.3不同光照及pH条件对药用真菌培养过程中总抗氧化能力(T-AOC)变化的影响
2.3.1光照不同光照条件对血红密孔菌培养过程中总抗氧化能力变化的影响较大(图5)。14 d光照条件下，血红密孔菌T-AOC在前10 d的生长过程中缓慢升高，于第2天的4.77 U/mL上升至11.92 U/mL，随后的第12～14天T-AOC含量波动较大，分别在第12天下降至7.34 U/mL，在第14天升高至12.52 U/mL；在1 d光照、1 d黑暗条件下，真菌总抗氧化能力的变化呈“W”型变化，于第2天6.72 U/mL下降至第4天的5.63 U/mL，然后平稳提高至第8天13.01 U/mL，接下来的4 d培养过程中，T-AOC下降至9.00 U/mL，最后的2 d T-AOC增强，并于第14天达到最高值14.18 U/mL；14 d黑暗条件培养下，真菌T-AOC在前10 d呈较缓慢的上升趋势，由第2天的5.39 U/mL缓慢上升至第10天的13.40 U/mL，随后在第10～12天的培养过程中，T-AOC迅速上升至25.10 U/mL，到第14天出现较小程度的降低，此时真菌T-AOC为23.39 U/mL。总体而言，3种光照培养条件下，T-AOC的最大值出现在14 d黑暗培养的第12天，为25.10 U/mL，较其他两组差异有统计学意义。因此，黑暗条件下有助于增强血红密孔菌的总抗氧化能力。
图5不同光照条件对血红密孔菌总抗氧化能力的影响
2.3.2 pH值不同pH条件对血红密孔菌培养过程中总抗氧化能力变化的影响较大(图6)。当pH为3和5时，血红密孔菌总抗氧化能力变化趋势基本一致，始终维持在较低水平(10 U/mL以下)；当pH为7时，总抗氧化能力从第4天开始迅速增加至第10天，并达最大值64.34 U/mL，随后逐步下降，在第14天降至47.69 U/mL；当pH为9时，总抗氧化能力从第6天快速上升，并于第8天上升至最大值62.49 U/mL，随后快速下降至25.9 U/mL(第12天)，然后维持基本不变。综上所述，偏酸环境对血红密孔菌抗氧化能力基本没有影响，而中性及偏碱环境对其影响较大，且对比偏酸环境差异显著。因此，中性及偏碱性环境更能提高血红密孔菌的总抗氧化能力。
图6不同pH条件对血红密孔菌总抗氧化能力的影响
3讨论
在不同的培养条件下，光照和pH值是真菌发酵过程中最重要的环境因素，对细胞的生长、产物的合成都有重要影响，进而影响其产量和抗氧化活性。本研究通过测定血红密孔菌培养过程中的生物量、DPPH自由基清除能力、T-AOC，探索了光照和pH对血红密孔菌生长及抗氧化活性的影响，为进一步研究和利用血红密孔菌提供参考。
研究表明，不同光照和pH条件对血红密孔菌培养过程中生物量、DPPH自由基清除率、T-AOC和多糖含量都有差异，但其影响程度不同。总体而言，黑暗环境更利于血红密孔菌的生长以及抗氧化活性的增强，且二者的增长趋势比较一致。相对于14 d光照和1 d光照、1 d黑暗交替的光照条件，血红密孔菌在14 d黑暗环境中有最大生物量，为4.49 g/L，是其他光照条件的1.5倍，同时中间生长过程伴随有基质的大量消耗；T-AOC于第12天达到最高值25.10 U/mL。不同pH条件对血红密孔菌培养过程中各项指标影响有一定差异。偏酸环境更适于血红密孔菌的生长，但中性和偏碱环境抗氧化能力较高。当pH为5时血红密孔菌在培养过程中产生的生物量在第10天达到最大值，为1.69 g/L。而DPPH自由基清除能力和T-AOC的最高值均出现在pH 7时，于第10天分别达到94.99%和64.34 U/mL。本研究初步分析了光照和pH值对血红密孔菌的生长与抗氧化能力的影响，为相关研究的细致分析，以及为分离分析该菌的抗氧化生理活性物质等相关工作提供参考，以促进开发和利用该菌的药用价值。
不同光照、pH条件对血红密孔菌培养过程中生物量、总抗氧化能力的影响（一）
不同光照、pH条件对血红密孔菌培养过程中生物量、总抗氧化能力的影响（二）
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