不同浓度巴西苏木素对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌生长及抑制作用（一）
摘要：目的探讨苏木及其活性成分对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRABA)的杀菌作用及巴西苏木素与美罗培南联合抑菌作用。方法收集2020年该院检验科微生物室分离的10株CRABA,采用微量肉汤稀释法测定苏木萃取液和巴西苏木素的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),采用高效液相色谱技术测定苏木萃取液的主要抑菌组分,采用绘制生长曲线方法观察巴西苏木素对CRABA生长的抑制作用,采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定巴西苏木素对CRABA分泌蛋白的影响,棋盘法观察巴西苏木素与美罗培南联合应用的抑菌效果。结果苏木萃取液对10株CRABA的MIC、MBC均为15.63 mg/mL,巴西苏木素的MIC、MBC均为0.5000 mg/mL;高效液相色谱法和MIC测定得到巴西苏木素为苏木萃取液中主要抑菌组分。巴西苏木素与美罗培南联用时,巴西苏木素的MIC值由0.5000 mg/mL降至0.1250 mg/mL,美罗培南的MIC值由0.128 mg/mL降至0.064 mg/mL,FIC指数为0.75。结论苏木中有效抑菌组分为巴西苏木素,其机制可能是通过影响细菌蛋白的分泌发挥杀菌作用。
鲍曼不动杆菌是一种需氧非发酵的革兰阴性杆菌，广泛存在于自然界及人体皮肤，为临床常见的条件致病菌。由于其生存能力强，并且存在多种耐药机制，常常有多重耐药的特性，而这种多重耐药鲍曼不动杆菌已成为医院感染的重要病原菌。碳青霉烯类抗菌药物曾被认为是抗菌活性最强的内酰胺类抗菌药物,但随着此类药物的广泛使用，鲍曼不动杆菌的耐药性日益增强，故临床对此类细菌面临无药可用的窘境。苏木作为传统天然中药，具有广泛的生物活性。有研究表明，苏木中成分巴西苏木素对各类微生物都有抑制作用，但对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii,CRABA)的抑菌作用国内外鲜有报道，本研究通过体外试验探究巴西苏木素对CRABA的抑制作用及其机制，并将巴西苏木素与美罗培南进行联合药敏试验观察其抑菌作用，为中药治疗CRABA感染提供参考，现报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
1.1.1菌株来源
收集2020年本院检验科微生物室分离的10株CRABA，其中5株来源于重症监护室，2株来源于急诊科，3株来源于其他科室。鲍曼不动杆菌对任何一种碳青霉烯类药物耐药判定为CRABA株。质控菌株为：美国模式培养物集存库(American type culture collection，ATCC)25922大肠埃希菌(Escherichia coli，ECO)；ATCC 25923金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，SAU)。
1.1.2试剂与仪器
苏木(康美药业股份有限公司)；苏木单体：巴西苏木素，原苏木素B(成都曼斯特生物科技有限公司)；美罗培南(北京索莱宝科技有限公司)；血平板(江门市凯林贸易有限公司)；肉汤培养基与MH琼脂平板(广州市迪景生物科技有限公司)；二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide，DMSO，天津市富宇精细化工有限公司)；DHP-9145A电热鼓风干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司)；全自动微生物生长动态监测仪(丹麦Biosense公司)；uLtiMate 3000型高效液相色谱仪(美国赛默飞世尔科技有限公司)；SPECTROstar Nano全波长酶标仪(德国BMG公司)。
1.2方法
1.2.1药物敏感试验
细菌分离培养鉴定及药物敏感性试验所有标本均按《全国临床检验操作规程(第4版)》及本实验室的作业指导书要求进行接种和培养，菌株分离纯化后使用丹麦Biosense微生物生长动态监测系统oCelloScope进行菌种鉴定和常规药物敏感性试验，按2020年美国临床实验室标准化协会(clinical and laboratory standards institute，CLSI)标准进行敏感性判断。
不同浓度巴西苏木素对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌生长及抑制作用（一）
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