嗜水气单胞菌AH1在TSB培养基中的生长曲线测定结果
本文测定了嗜水气单胞菌AH1在TSB培养基中的生长曲线进行研究,结果表明,该菌属于一种生存能力较强的细菌,前期不易死亡,后期死亡较快。
测定与研究
嗜水气单胞菌AH1的生长曲线
嗜水气单胞菌AH1在TSB培养基中培养时,该菌落总数及0D600值随时间变化曲线如图1所示。从图中可以看出,种子液接种后前4h嗜水气单胞菌的菌落总数对数值相对较低,处于延滞期;4h之后菌落总数开始迅速上升,进入对数生长期,培养18h左右,培养基中的活菌落总数的对数值上升至最高峰达到7.3;19h至28h,嗜水气单胞菌的菌落总数开始逐渐稳定,为稳定期;28h开始嗜水气单胞菌AH1菌落总数对数值略为下降,进入衰亡期。该菌的OD600值在4h之后开始显著地上升,这个上升期一直持续到19-20h,并在20h附近OD600达到最高峰1.8,而在30h后OD值又开始小幅下降。以上分析可得:嗜水气单胞菌AH1在TSB培养基中培养时,0-4h属于延滞期,期间细胞数目没有显著的增加,OD600的数值也几乎为零;从4h起至18h,细菌处于对数生长期,菌体以几何数增加,增长速度快,期间OD600迅速上升;19-28h是稳定期;第28h后进入衰亡期,此时OD600略有下降。
图1菌落总数及吸光值(OD600)与时间的关系图
嗜水气单胞菌AH1生长过程中OD600与活菌数的关系
挑取单菌落接种于28℃的固体培养基中培养,一定时间后用TSB洗下菌苔,稀释成不同的OD值,测其活菌数;如图2所示为嗜水气单胞菌在TSB中的活菌数与OD值的关系,从图中可以看出,当OD600值小于1时,OD600值与其活菌数呈现出良好的线性关系(y=17.081x-0.226),因此当OD600值小于1时,可以准确地从表中读出相对应的活菌数。
嗜水气单胞菌AH1生长过程中pH值的变化
嗜水气单胞菌AH1在TSB培养基中培养时,培养基的pH值随培养时间的变化规律如图3所示,由图3的曲线可以看出,该菌在培养过程中产酸能力较强,在培养过程中培养基的pH值下降得非常快,培养时间为18h左右时,培养基的pH值降至最低,此时pH仅为6.3左右;培养时间在18-30h之间,培养基的pH趋于稳定;30h后,培养液的pH值略微上升并稳定在6.6。
嗜水气单胞菌AH1在不同溶液中的生存时间的测定
嗜水气单胞菌AH1分别保存于生理盐水、PBS和TSB培养基中,置4℃条件下,间隔24h测定不同溶液中的细菌的活菌数,其结果如图4所示。由图4可看出,嗜水气单胞菌AH1是一种生存能力较强的细菌,不管是在生理盐水、PBS溶液还是TSB培养基中,前期都不容易死亡,后期则死亡较快。表明该菌抗逆性较强,给致病性的嗜水气单胞菌的杀灭带来了一定的难度。
图2嗜水气单胞菌AH1在生长过程中OD600值与活菌数的关系
图3 pH值随时间变化
图4嗜水气单胞菌AH1在不同溶液中的生存时间
结论
(1)嗜水气单胞菌AH1在TSB培养基中培养时,0-4h属于延滞期,期间细胞数目没有显著的增加,OD600的数值也几乎为零;从4h起至18h,细菌处于对数生长期,菌体以几何数增加,增长速度快,期间OD600迅速上升;19-28h是稳定期;第28h后进入衰亡期,此时OD600略有下降。
(2)在OD600值小于1.0的情况下,嗜水气单胞菌AH1的OD600值与活菌数之间满足线性关系y=17.081x-0.226,当OD600值小于1时,可以准确地从图中读出相对应的活菌数。
(3)嗜水气单胞菌AH1的产酸能力较强,当培养进行了18h后培养基的pH值便会降至最低点6.3,当培养进行了30h之后,培养基的pH值会逐渐上升并稳定在6.6。嗜水气单胞菌AH1的这一特点,可以为今后该病原菌的生理鉴定提供一定的参考与借鉴。
(4)嗜水气单胞菌AH1是一种抗逆性比较强的细菌,若用生理盐水、PBS或者TSB培养基培养该菌,其前期活菌数均不会发生明显变化,后期则死亡较快。这表明该菌属于一种生存能力较强的细菌,这给致病性的嗜水气单胞菌的杀灭带来了一定的难度。
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