复方大果木姜子软胶囊对肿瘤细胞Hep-2生长曲线的影响
研究复方大果木姜子软胶囊对肿瘤细胞Hep-2的拮抗作用。方法台盼蓝染色法及生长曲线法。结果通过观察药物作用于细胞后对其正常生长曲线的影响,发现药物作用于Hep-2细胞后,明显延长细胞正常生长的倍增时(TD2=3.245)从而抑制Hep-2的正常生长。结论复方大果木姜子软胶囊对肿瘤细胞Hep-2的生长具有明显的抑制作用。
实验过程
取处于对数生长期的Hep-2,用含10%新生牛血清的RPMI1640培养基配制为1×104/ml的细胞悬液,在25 ml培养瓶中接种5 ml,共接种21瓶,分为正常组、药物组与阳性对照组(每组7瓶),分别加入终浓度为EC50的受试药物与对照药物,在给药2 h,1、2、3、4、5、7 d时分别取样40μl(取样时先用2.5%的胰蛋白酶将贴壁细胞充分消化),加入0.4%的台盼蓝试剂10μl染色后,在显微镜下进行细胞计数,以每天细胞计数结果的对数为纵轴,以时间为横轴绘制细胞生长曲线,对比观察药物对各实验细胞的生长抑制作用,结果见表2及绘制的各实验组在不同实验条件下的细胞生长抑制曲线图,见图1。
实验结果及分析
依据药物作用于细胞倍增时(TD)公式：TD=0.301 t/(logNtlogNo)(t：培养时间,No：首次记下的细胞数,Nt：t时间后的细胞数)可以求得：空白组TD1=1.081；药物组TD2=3.245；对照组TD3=2.361。
通过上述数据分析可知：与空白组细胞正常倍增时(TD1=1.081)比较,复方组作用于Hep-2细胞后可以明显的延长细胞的倍增时(TD2=3.245),且作用强于对照组(TD3=2.361)；同时,结果表明,复方对Hep-2细胞的抑制作用是通过影响Hep-2细胞的正常生长周期而发挥作用。
药物对Hep-2细胞生长饱和密度的影响(NS)：从细胞生长抑制图中可以看出,药物作用于Hep-2细胞后,明显影响其正常生长,细胞生长饱和密度显著降低,与正常组细胞比较,细胞生长达大坪期的时间与细胞数目显著降低,但作用与喜树碱相比略差。
结论：本研究以Hep-2细胞株为筛选模型,采用体外抑制肿瘤增殖的方法,对复方大果木姜子软胶囊的药物有效部位采用台盼蓝染色法结合细胞生长曲线绘制从而直观的表明实验药物对Hep-2的生长抑制作用。