嗜热链球菌生长曲线绘制：分光光度法VS直接计数法
分光光度法和直接计数法整体比较嗜热链球菌在适宜生长条件下菌体细胞生长出现4个阶段:调整期、对数期、稳定期、衰亡期。
生长曲线反映了嗜热链球菌在培养过程中的繁殖规律，同一嗜热链球菌在不同培养条件下的生长曲线不同，不同测定方法测得的生长曲线也不同。目前，主要采用分光光度法和直接计数法测定生长曲线。
前者所测为包含已死亡菌体和因菌体自溶产生的吸光值，并且据朗伯—比尔定律，各类低浓度溶液吸光值定量测定的依据，浓度过高或过低均影响测量结果的准确性。后者所测为实际观察并计数得到的菌体细胞数量。用分光光度法和直接计数法分别测定M17培养基双麦麦精添加量为9.36g时，嗜热链球菌不同生长时间培养液的OD600值和菌体数量，绘制其生长曲线，并对2种测定方法所绘制的生长曲线进行比较，分析差异，见图1。
图1嗜热链球菌生长曲线
两条曲线通过相关系数分析，相似度比较高，相似度系数为0.977。说明嗜热链球菌培养液OD600值的吸光度与直接计数细胞数量呈强相关性。分光光度法和直接计数法测定的生长曲线在对数期以前基本一致。在对数期，直接计数法所得生长曲线整体高于分光光度法所得生长曲线，可能由于菌体繁殖比较旺盛，使得菌体在培养基中成活率较高。稳定期分光光度法高于直接计数法，可能由于稳定期内菌体的自溶速度小于其缓慢的增长速度，同时随着代谢产物增多，使吸光度略微偏高。
嗜热链球菌在对数期的OD600值与直接计数法测得嗜热链球菌的关系以OD600值为横坐标，直接计数法测定的细胞数量为纵坐标，绘制XY散点图，利用最小二乘法绘出两者的回归曲线，结果见图1。回归方程为y=－11.489x2+35.968x+6.1745(R2=0.9998)，回归方程具有极显著意义。
图2对数生长期OD值与直接计数细胞数量的关系
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