红螯螯虾源布氏柠檬酸杆菌分离鉴定和耐药性分析（三）
2.3细菌耐药性试验
结果如表2所示，分离菌株对β-内酰胺类抗菌药苯唑西林、哌拉西林、头孢唑林、头孢哌酮和头孢他啶耐药，对头孢曲松中介;对碳青霉烯类抗菌药亚胺培南耐药;对喹诺酮类抗菌药诺氟沙星敏感，对氧氟沙星和环丙沙星中介;对酰氨醇类抗菌药氯霉素敏感，对氟苯尼考中介;对多肽类抗菌药万古霉素耐药，对多黏菌素B中介;对磺胺类抗菌药复方新诺明耐药;对林可霉素类抗菌药克林霉素和林可霉素耐药;对四环素类抗菌药四环素耐药，对米诺环素中介，对多西环素敏感;对大环内酯类抗菌药红霉素耐药;对氨基糖苷类抗菌药卡那霉素耐药，对链霉素中介，对阿米卡星和庆大霉素敏感。
表2分离菌株171215-10的耐药性分析
3讨论
红螯螯虾(Cheraxquadricarinatus)又名澳洲淡水龙虾，因其肉质细腻、味道鲜美被广泛传播到世界各地，我国于1992年首次将其引进湖北省试养，并逐渐向全国推广。红螯螯虾的商业需求不断增长，但养殖产量却不见增加，这主要是由于种苗培育技术和病害防治等方面的研究不够深入，同时这也成为红螯螯虾养殖可持续发展的技术瓶颈。本试验从红螯螯虾肠道内分离到革兰阴性菌株171215-10，其生化特征与Brenner等发现的布氏柠檬酸杆菌基本吻合，可初步鉴定该菌株为布氏柠檬酸杆菌。采用16S rDNA序列进行同源性比较，经系统进化树分析，分离菌株171215-10与Citrobacterbraakii聚为一支，因此可将菌株171215-10鉴定为布氏柠檬酸杆菌(Citrobacterbraakii)。人工感染斑马鱼试验结果显示，该分离菌株具有较强的致病性，1.5×108CFU/mL组可致斑马鱼在2 d内100%死亡，累计存活率为0%，且人工感染斑马鱼分离得到的细菌与原感染菌的形态和生化特征一致。
布氏柠檬酸杆菌最早由Brenner等鉴定，为柠檬酸杆菌属中的条件性致病菌。当有基础性疾病的患者同时感染布氏柠檬酸杆菌时，通常治疗难度会增加。Tollkuci等研究发现，1名造血干细胞移植患者因发生了布氏柠檬酸杆菌引起的血液感染(Centralline-associated blood stream infection，CLABSI)。Seo等报道显示，1名白血病患者因感染布氏柠檬酸杆菌而引起休克。Oyeka等报告了1名多病症患者因感染布氏柠檬酸杆菌而出现组织炎和胸腔积液症状，最终治疗无效而死亡。此外，研究人员已从多种水生生物中分离鉴定出布氏柠檬酸杆菌，如鲶鱼(Ictaluruspunctatus)、虹鳟(Oncorhynchusmykiss)、彩虹鱼(MelanotaeniaPraecox)、鲐鱼(Pneumatophorusjaponicus)和青鱼(Mylopharyngodonpiceus)等。而本试验从红螯螯虾肠道内分离出布氏柠檬酸杆菌，这在此前的研究中尚未发现。布氏柠檬酸杆菌为人兽共患病原菌，严重感染时可致宿主死亡，应引起重视。
本药物敏感试验结果显示，布氏柠檬酸杆菌171215-10仅对25种抗菌药中的5种药物敏感，包括诺氟沙星、氯霉素、多西环素、阿米卡星和庆大霉素。不同鱼体内分离得到的布氏柠檬酸杆菌对抗菌药的耐药性不同，可能与宿主来源和环境差异有关。此外，本药敏试验结果显示，布氏柠檬酸杆菌171215-10对碳青霉烯类抗菌药高度耐药，这一发现在布氏柠檬酸杆菌的研究中已多次被验证，Yao等的研究检测出10株布氏柠檬酸杆菌有碳青霉烯耐药基因KPC-2，Dong等首次对产KPC-2碳青霉烯酶布氏柠檬酸杆菌进行质粒回收，这些报道均表明布氏柠檬酸杆菌有可能成为环境中碳青霉烯类抗菌药耐药性的潜在传播者。多黏菌素B是对抗产生碳青霉烯酶的多重耐药性革兰阴性菌的重要抗菌药，本药物敏感试验结果中，多黏菌素B对布氏柠檬酸杆菌171215-10为中介。此外，据农业农村部公告《水产养殖用药明白纸》显示，在水产养殖中已禁止使用诺氟沙星和氯霉素，本试验中对布氏柠檬酸杆菌171215-10敏感的防控药物也将越来越少。因此，在水产动物病害防治中应及时进行病原分离和药敏试验，以科学且有针对性地进行治疗。
相关新闻推荐
1、DNA甲基化是什么意思？DNA甲基化转移酶与生长抑制（一）