刺糖多孢菌生长曲线的测定与最佳培养温度
刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)属糖多孢菌属,是一种好氧型革兰氏阳性的非抗酸性放线菌,其有氧发酵可产生次级代谢产物多杀菌素。多杀菌素是一种新型高效的生物杀虫剂,主要用于农林虫害、储粮虫害、卫生虫害、牲畜寄生虫害的防治,其产品目前主要用在棉花、果蔬、茶叶、烟草、中草药、粮食等作物上。
将试验菌种接种于新鲜斜面培养基中,29℃培养7 d,用无菌水制备成数量级为108个/mL的孢子悬液,按1%接种量接入种子培养基,于29℃摇床培养7 d。摇瓶装液量为30 mL/250 mL,玻璃珠6个,摇床转速为240 r/min,偏心距为26 mm。每12 h取样,测定样品的生物量和pH,以上试验设3次重复。
测定结果
图1刺糖多孢菌的生长曲线
刺糖多孢菌C3-10-4的生长曲线见图1。从图1中可以看出,菌株在生长36 h后进入对数生长期,72 h后进入平稳期。pH呈现稳步增长的趋势,变化范围从pH 6.9到8.9,当pH>8.7时,菌丝体出现断裂,开始自溶。pH是影响菌株体内各种酶活性的重要因素,pH的变化会引起酶活力的改变,从而影响菌株在培养过程中的代谢速度,甚至改变其代谢途径和细胞结构[18]。菌丝繁殖到一定程度后,由于养分的耗尽以及代谢产物的积累,菌体量不再增加,菌丝体逐渐老化,工业发酵生产中,要选择菌体处在生命力极为旺盛的对数生长期,且培养液的菌体量未达到高峰的时期作为移种时间。从生长曲线来看,刺糖多孢菌最适种龄在60~70 h为宜。
小结:
种子的质量是发酵能否正常进行的重要因素之一,通过对刺糖多孢菌种子培养基的筛选与研究,确定其最佳培养温度29℃、摇床转速240 r/min、玻璃珠个数6个、摇瓶装液量30 mL/250 mL。利用Gompertz方程对生长曲线进行拟合,得到拟合曲线方程为:X=8.420exp[-exp(2.183-0.057 5t)]
相关新闻推荐
2、pPopctrl质粒转化的大肠杆菌top10F生长与突变规律
3、RW、WK、SF发酵菌株不同组合对紫秋葡萄酒品质、香气的影响(一)