高龄妇女的生育能力下降,LED光照或能改善卵巢功能
新型光源-发光二极管作为光治疗的一种新手段在健康和医疗中的应用尚处于起步阶段,且近年来随着国内LED芯片技术的快速提高,新型LED光源因寿命长、光谱窄、产热低、光电转化率高等优势使其开始被应用于健康和医学领域,并且快速发展。尤其在代谢、心血管、神经、皮肤及免疫系统疾病,LED无创光疗对能够起到防治和辅助性治疗的作用,临床需求巨大。
光疗作为一种有效的治疗手段,在临床和工程上正得到越来越广泛的应用,其理论基础是生物组织吸收光能并将光能转化为热能和化学能,从而导致体内产生一系列的化学反应,这些化学反应包括光致分解、光致氧化、光致聚合和光致敏化,LED作为一种新型光源,随着光的生物效应逐步被人们所认识,正逐步应用于医学中并发挥积极的作用。
当前女性晚婚晚育趋势增加,高龄妇女的生育能力下降成为了一个严峻的社会和医学挑战。
综上所述的问题,为此,提出一种窄带LED光设备及使用该LED光照改善卵巢功能的方法。
窄带LED光设备的LED光照改善卵巢功能的方法,包括以下步骤:
步骤S1、小鼠选择和分组:
第一部分选用7月龄C57雌鼠,第二部分选用2月龄C57雌鼠,并将小鼠随机分为自然光对照组和不同波长LED光照射组,每组6只小鼠,在新环境中适应一周后将小鼠背部剃毛,确定照射位置并标记;
步骤S2、窄带LED光设备的组装,以及设置;
步骤S21、将实验鼠透明罩505放置入LED光源架501的实验腔504内部;
步骤S22、将小鼠放置入实验鼠透明罩505的内部,再通过转柄508转动调节螺杆507推动实验鼠压板506移动,使得实验鼠压板506将压力作用于小鼠,将小鼠压在实验鼠透明罩505的内部;
步骤S23、在50mw光功率密度下,用不同波长的LED照射灯503LED光照射小鼠5min,连续照射15天,模拟临床治疗3个疗程;
步骤S3、将处理后的雌鼠通过阴道抹片检测发情周期;
步骤S4、雌鼠激素测定;
步骤S41、LED光照射结束后,在小鼠处于发情间期时,对小鼠行眼眶采血,收集到1.5mL离心管中静置,4℃过夜,3500rmp离心5min,吸取上层血清,-80℃冻存;
步骤S42、用放射免疫法测定血清中检测血清中促卵泡生成激素(FSH)、促黄体生成激素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)、催乳激素(PRL)、AMH激素水平;
步骤S5、卵巢组织采集和组织学评估;
步骤S51、在取血后,将小鼠安乐处死,取出卵巢组织,一个卵巢冻到-80℃冰箱,另一个卵巢进行固定、包埋和切片处理;
步骤S52、对组织连续切片后进行染色,对染色的连续切片进行计数,计数方法为每五张连续切片中,随机选取一张对其中的卵母细胞(DDX4阳性)的数量进行统计;
步骤S53、将统计结果加和,再乘以校正数值(5),即为最终的卵巢中各级卵泡数;
步骤S6、基因表达分析:
步骤S61、使用RT-PCR和RNA-seq技术,对实验组和对照组卵巢组织的总RNA进行基因表达分析;
步骤S62、使用免疫组化染色技术,检测卵巢组织中标记分子的分布情况;
步骤S7、后代评估:对产下的仔鼠每隔7天进行拍照并观察其状态,并每隔7天测量仔鼠的体重,记录体重数据以便绘制生长曲线,以评估仔鼠的生长速度和趋势;
步骤S8、数据分析和统计:对见栓率、怀孕率和产仔数进行统计学分析,比较实验组和对照组之间的差异;
阴道栓检查和配种实验检测见栓率、怀孕率;
见栓率=见栓雌鼠/总交配雌鼠
怀孕率=产仔的雌鼠数/见栓的雌鼠数。
该设备检测红光到红外波段的窄带LED光对高龄卵巢功能及受孕能力的影响,数据表明630nm LED光,光功率密度为50mW,光照5min可以提高高龄小鼠的受孕能力和平均窝产仔数,提高AMH水平。
该设备检测红光到红外波段的窄带LED光疗在促进损伤子宫内膜和薄型子宫内膜修复方面的作用,结果表明630nm LED光,光功率密度为50mW,光照5min可以修复薄型子宫,使部分小鼠怀孕,但同时该条件下LED光照射可能会有一定程度的副作用,需要进一步筛选合适的LED光波长及光功率密度。