越来越多的研究表明，肠道微生物群快速、高精确地对饮食、抗生素、环境、精神压力等外界刺激产生反应，与人体肥胖、精神类、代谢类和免疫类等疾病息息相关。食用益生菌和益生元能增强肠道中有益的共生群体，达到增强人体免疫力的效果，然而益生菌进入消化道，需要克服胃酸消化、定植力以及存活率等棘手问题。比较而言，益生元是不可消化的膳食多糖，当外部供应时可以促进遗传性肠道微生物或益生菌的生长，因此对益生元的研究非常有意义。Ramirez-Farias等研究发现，菊粉的摄入刺激了青春双歧杆菌的生长；Cani等发现，向HFD小鼠喂养低聚果糖导致双歧杆菌数量大大增加，从而减少LPS产生的炎症标志物；Joossens等报道17名志愿者摄入富含低聚果糖的菊粉，导致双歧杆菌和青春双歧杆菌物种的显著增加。益生元的种类有很多，主要包括低聚糖类、多元醇、蛋白质水解物以及天然植物提取物等。目前研究和应用较多的是功能性低聚糖类，如低聚木糖和低聚果糖。植物提取物作为天然食品的来源具有更好的发展优势和前景，符合人们对健康饮食潮流的追求。

人参是天然植物资源的一种，其药用历史已有4 000余年。根据《中华人民共和国食品安全法》和《新资源食品管理方法》的规定，2012年8月29日批准人参（人工种植）为新资源食品，由此人参作为药食兼用植物进入日常生活中。红参是人参蒸制干燥后的熟制品，富含人参皂苷、多糖、多肽、微量元素和氨基酸等多种营养物质，具有补气、补血，复脉固脱、安神定魂和止惊悸等功效，又因其具有提高免疫力，抗肿瘤、抗辐射以及抗衰老等生理功能而被广泛应用于医药和化妆品领域等。目前对红参多糖的研究不多，主要集中在提取、纯化和鉴定以及药理与临床应用等方面，其作为益生元的益生功能方面的研究几乎没有。仅本实验室丁硕曾研究红参等9种健脾胃天然植物对益生菌体外生长的影响。对红参作为益生元研究的缺乏，限制了红参的应用。有必要研究红参对乳酸菌的体外增菌效果。

本试验中以红参为主要材料，以典型益生元低聚木糖和低聚果糖为参照，研究红参对典型益生菌鼠李糖乳杆菌AS 1.2466T和传统发酵菌保加利亚乳杆菌ATCC 11842两株菌体外生长的影响，为红参调节小鼠肠道菌群失调的体内试验奠定基础，也为发掘功能性食品与饲料奠定理论基础。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1菌种鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）AS 1.2466T、德式乳杆菌保加利亚亚种（Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus）ATCC 11842，中国普通微生物菌种保藏中心。

1.1.2原材料红参片，保定市普康大药房提供；低聚果糖（FOS）和低聚木糖（XOS），保龄宝生物股份有限公司。

1.1.3发酵培养基

1）基础培养基蛋白胨10 g，牛肉膏3 g，氯化钠5 g，蒸馏水定容1 L，121℃，15 min灭菌。

2）菊芋汁基础培养基菊芋→清洗称重→加水（m料∶m水=1∶1）→加热灭酶（100℃，5 min）→加水捣碎（补加适量80℃水）→过滤（100目滤布）→滤渣加水压榨→加水定容100 mL→调配（糖度约10 Brix，pH 6.5～7.0）→加热灭菌（121℃15 min）→冷却，备用。

1.2试验方法

1.2.1菌株生长曲线的绘制鼠李糖乳杆菌AS 1.2466T/保加利亚乳杆菌ATCC 11842经MRS液体培养基活化至109CFU/mL/108CFU/mL，以1%的接种量接种于基础培养基/菊芋汁基础培养基和液MRS中，37℃/42℃培养，每隔2 h取样测定OD600值。以培养时间为横坐标，OD600值为纵坐标，绘制两株菌在不同培养基中的生长曲线。

1.2.2红参多糖含量的测定

1）红参提取液制备称取红参100 g，加水200 mL浸泡过夜，置于95℃水浴3 h，过滤，取滤渣加水200 mL继续水浴，最后合并滤液浓缩至100 mL，按照药液质量分数100 g红参∶100 g水定义为100%原药液。

2）红参酸水解物制备模拟人体胃环境，将红参提取液pH值调为3.0，37℃培养箱恒温4 h，制成红参酸水解物。

3）红参多糖含量测定采用苯酚硫酸法测定红参提取液多糖含量。分别取葡萄糖标准溶液0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 mL，补水至2 mL，摇匀。各加入1 mL的5%苯酚溶液，摇匀后迅速加入5.0 mL浓硫酸，混匀，静置10 min后40℃水浴15 min，冷却至室温，测定OD490值。以OD490值为纵坐标，葡萄糖标准液浓度为纵坐标，绘制葡萄糖标准曲线。吸取红参提取液1 mL，稀释到合适倍数，以1 mL蒸馏水为空白对照，按照上述操作测定红参提取液的多糖含量。

1.2.3 3种益生元对两株乳酸菌体外生长的影响

向基础培养基/菊芋汁基础培养基中添加质量分数为0%，3.125%，6.25%，12.50%，25%和50%的红参提取液及其酸水解物以及0%，0.4%，0.8%，1.2%，1.6%和2.0%的低聚果糖和低聚木糖。将活化好的鼠李糖乳杆菌AS 1.2466T/保加利亚乳杆菌ATCC 11842以1%接种量接种于基础培养基/菊芋汁基础培养基及其添加不同量益生元的基础培养基/菊芋汁基础培养基中，37℃/42℃恒温培养至对数生长末期，取菌，测定其吸光度OD600和活菌数。根据OD600值和活菌数比较红参提取液及其酸水解物和两种低聚糖对鼠李糖乳杆菌AS 1.2466T和保加利亚乳杆菌ATCC 11842体外生长的作用。

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